混合在饲料中的微益生菌有助于细菌在虾的肠道中生存,并牢固地粘附在虾的肠道中,形成保护性微生物屏障,并在进入点抑制弧菌。因此,对养殖户来说,疾病控制变得更有效和可持续。
目前,在育苗水中添加益生菌的办法能够改善虾的健康和水质。但是,这种方法有很多局限性。在水中保持有效的益生菌剂量通常很昂贵。典型使用率为3–5 ppm/天,含有109 CFU/g的制剂在水中仅达到约3000–5000 CFU/mL。这个水平的成本相对可接受,但为了有效控制病原体,一些研究表明需要接近106 CFU/mL 的浓度(Ghosh,2025),这增加了治疗成本。即使剂量增加到50ppm/天,益生菌密度也只有5×104 CFU/mL左右。
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另一个局限性是水性益生菌不能稳定存在于幼苗肠道中。虽然它可能有助于减少水池中弧菌的总量,但它并不能阻止幼苗从受污染的卤虫或有机物中摄入弧菌。一旦病原体通过肠黏膜进入,仍可引起严重感染。
保护虾免受弧菌感染的更有效方法是将益生菌直接引入饲料中。这种方法有助于益生菌在肠道中稳定,形成保护性微生物屏障,并在进入点预防病原体。
虽然很难直接测量益生菌在虾幼苗中的活力,但齐格勒与菲律宾米沙鄢大学合作的研究表明,当给虾苗使用芽孢杆菌剂量(5×106 CFU/g)时,芽孢杆菌菌株迅速附着在肠壁上,仅7天后肠道组织密度就达到了1×107 CFU/g。
一旦定居,芽孢杆菌就会通过许多辅助机制抑制弧菌:粘附和营养位点的竞争、细菌素和脂肽等抗菌化合物的分泌、免疫刺激(吞噬作用、免疫基因的表达)以及维持肠粘膜的完整性。因此,通过饲料添加芽孢杆菌比外泼方法提供了更可持续的弧菌控制效果。
芽孢杆菌很适合作为虾饲料的成分,因为它们能够形成孢子,易于包装和储存。它们还拥有非常良好的适应性,可在孵化场环境的各种盐度、温度和pH值范围内有效运行。此外,芽孢杆菌属产生抗菌化合物和酶,能抑制弧菌、破坏生物膜并阻止细菌细胞之间的通讯(Shaheer等人,2021年;Ghosh,2025年)。
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然而,并非所有芽孢杆菌菌株都具有相同的效果。有些菌株专门抑制弧菌,而另一些菌株则更适合分解废物或降低氨水平。因此,选择正真适合的菌株是重要的一步。
Zeigler等人研究,测试了21种芽孢杆菌菌株抑制四种致病性弧菌菌株的能力(图1),并选择了四种最有效的菌株来开发益生菌产品。同样,还筛选了许多芽孢杆菌菌株的氨还原和有机降解(图2),其中五种菌株被选用于益生菌产品。此选择过程有助于确保每次使用的最佳效率。
事实证明,在饲料中添加益生菌能带来许多好处,但由于生产中的挑战,特别是在高温下保持颗粒过程中细菌的活力,它仍然受到限制。虽然芽孢杆菌孢子耐热性好,但一旦发芽,它们就会变得敏感,很容易因热而死亡。预混料混合物中的水分也会在压榨前引发发芽,导致孢子不再经受热。
在孵化和商业化养殖阶段,益生菌可以在饲料颗粒表面涂上油,但这种方法不适用于幼苗饲料,因为压榨后的饲料经过精细研磨和筛选。涂上油会造成结块,降低质量和可用性。
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为了解决这一个问题,Zeigler开发了一种使用制冷工艺的专有技术,将益生菌直接整合到幼苗的液体饲料中。这保留了孢子的发芽,并确保了EZ Larva Ultra和EZ Artemia Ultra产品的均匀供应。Rescue–抗弧菌芽孢杆菌菌株的混合物,封装在微胶囊中,可精确输送到幼苗肠道,而Remediate – 一种减少铵和有机废物的配方,集成在液相中,有助于在喂食时快速分散到水中。若使用得当,这两种产品都能提供有效水平的活孢子。
除了益生菌,Zeigler的液体饲料还含有有机酸和Vpak——一种多种功能性成分的混合物,可支持免疫力、改善营养吸收并增强对氧化应激的抵抗力,从而优化水生幼虫的整体健康益处。
由于虾幼苗在肠道中的储存时间很短(只有大约20-30分钟,Jones等人,1997 年),有的人觉得最近一段时间不足以让益生菌孢子发芽和定居。为了验证这一点,Zeigler水产养殖研究中心进行了一项实验,比较了两种饲料配方:不含益生菌的对照和含有Remediate(液体)的Rescue补充剂。
结果显示,益生菌组的存活率达到83.3%,明显高于对照组的50%,相对应提高33.3%。这证明液体饲料中的有益菌可以定居在虾肠中,明显降低死亡率。同时,事实上,通过饲料补充益生菌比单独外泼更有效。
实验证实,通过饲料补充益生菌,是控制孵化过程中弧菌的一种生物学有效的策略。直接将芽孢杆菌引入虾苗保护膜中,有助于它们在肠道中定居,抑制病原体,并刺激对虾最脆弱阶段的免疫力。Zeigler的液体饲料技术保持了益生菌的活力和稳定剂量,克服了外泼方法的局限性。该策略有助于降低死亡率、提高虾苗质量、减少抗生素依赖,并增强孵化场的生物安全。
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